中藥理化鑒定
理化鑒定是用物理的或化學(xué)的方法,對(duì)中藥材及其制劑所含的有效成分、主成分或特征性成分進(jìn)行定性、定量分析,以鑒定真?zhèn)巍⒃u(píng)價(jià)品質(zhì)。
對(duì)于化學(xué)成分不清楚,或因次要成分的干擾而無法進(jìn)行主成分分析時(shí),可選用一些特殊的色譜、波譜峰進(jìn)行鑒定和識(shí)別。
常用的理化鑒定方法主要有定性反應(yīng)、色譜法和波譜法。
(1)顏色或沉淀反應(yīng)
各類成分因結(jié)構(gòu)或功能團(tuán)的不同,常與某些特定試劑發(fā)生反應(yīng),產(chǎn)生不同的顏色或沉淀。如生物堿與碘化鉍鉀生成橙色沉淀;蒽醌類與堿液反應(yīng)生成橙、紅、藍(lán)色;黃酮類與鹽酸鎂粉的反應(yīng),香豆精和內(nèi)酯類的異羥肟酸鐵反應(yīng),皂甙類的 Liebermann一Burchard反應(yīng),強(qiáng)心甙的K一K反應(yīng),酚類的三氯化鐵反應(yīng),鞣質(zhì)的明膠沉淀反應(yīng),氨基酸的茚三酮反應(yīng),糖類的苯酚一硫酸反應(yīng)等。
(2)色譜法
目前已成為藥材和成藥鑒定中不可缺少的常規(guī)而有效的方法,特別是對(duì)成分復(fù)雜的中藥、天然藥物,有著分離、分析鑒定雙重的優(yōu)勢。常用的色譜鑒定方法有薄層色譜法、氣相色譜法、高效液相色譜法、紙色譜法、凝膠電泳、毛細(xì)管電泳等技術(shù)。
、俦由V法:是中藥鑒定中最常用且簡便、直觀、經(jīng)濟(jì)的一種色譜法,樣品點(diǎn)樣展開后,可通過斑點(diǎn)的熒光或顯色反應(yīng)直接鑒定比較,也可通過掃描定性、定量分析,幾乎適用于所有的動(dòng)、植物類藥材的鑒定。最常用的是硅膠薄層色譜法。
、跉庀嗌V法:適合于揮發(fā)性成分或通過衍生化后能夠氣化的成分的定性、定量分析,具有靈敏度高、分離效率高等優(yōu)點(diǎn),特別是氣相色譜-質(zhì)譜-計(jì)算機(jī)聯(lián)用技術(shù)的發(fā)展,對(duì)于富含揮發(fā)油類藥材的鑒別,氣相色譜已成為一種首選的方法。不揮發(fā)的成分,也可采用裂解氣相色譜或閃蒸氣相色譜來進(jìn)行鑒定。
、鄹咝б合嗌V法:具有柱效高、分離度好、重現(xiàn)性好等特點(diǎn),配以不同類型的檢測器,可對(duì)多種中藥成分進(jìn)行分析,尤其適合于具有紫外吸收的化合物的分析;一般常用于含量測定,但也可根據(jù)特征色譜峰和指紋圖譜進(jìn)行定性分析,特別是三維高效液相色譜(HPLC)的發(fā)展,使定性分析更為方便。
、芗埳V法:是一種分配色譜,可用于氨基酸、糖類等水溶性成分的分析。
⑤凝膠電泳:適合于肽類、核酸、多糖等大分子化合物的分析鑒定。特別是分子生物學(xué)的發(fā)展, DNA指紋圖譜分析應(yīng)用于植、動(dòng)物的鑒定,與次生代謝產(chǎn)物的分析相比,更能反映物種的內(nèi)在遺傳變異規(guī)律。
③毛細(xì)管電泳:是近年發(fā)展起來的新的分析技術(shù),它集HPLC與電泳技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)于一身,使中藥成分的分析范圍更廣闊、更靈敏,因?yàn)樗鼜母旧辖鉀Q了HPLC分析最頭痛的柱效問題。
。3)波譜法
根據(jù)中藥成分結(jié)構(gòu)的不同會(huì)產(chǎn)生特征的吸收峰。常見的有可見一紫外分光光度法、紅外分光光度法、串聯(lián)質(zhì)譜、核磁共振、調(diào)線分析等。
、倏梢娨蛔贤夥止夤舛确ǎ阂话阌糜诳偺崛∥锘虿糠痔崛∥镏心愁惓煞值暮糠治觯部赏ㄟ^導(dǎo)數(shù)光譜法進(jìn)行混合物中單一組分的測定,或通過指紋圖譜進(jìn)行定性分析。
、诩t外分光光度法:主要用于指紋圖譜的分析、鑒定。
、鄞(lián)質(zhì)譜法(MS/MS):可直接用于粉末藥材(成藥)的分析、鑒定,是一種新的質(zhì)譜技術(shù)。
、芎舜殴舱癫ㄗV法(NMR):可用于具有特定結(jié)構(gòu)類型化合物的定性、定量分析,如藥用植物中吡咯里西啶生物堿的NMR分析。
、軽線分析法:主要適用于礦物類藥材的分析、鑒定,也可應(yīng)用于粉末藥物的直接分析。
對(duì)于化學(xué)成分不清楚,或因次要成分的干擾而無法進(jìn)行主成分分析時(shí),可選用一些特殊的色譜、波譜峰進(jìn)行鑒定和識(shí)別。
常用的理化鑒定方法主要有定性反應(yīng)、色譜法和波譜法。
(1)顏色或沉淀反應(yīng)
各類成分因結(jié)構(gòu)或功能團(tuán)的不同,常與某些特定試劑發(fā)生反應(yīng),產(chǎn)生不同的顏色或沉淀。如生物堿與碘化鉍鉀生成橙色沉淀;蒽醌類與堿液反應(yīng)生成橙、紅、藍(lán)色;黃酮類與鹽酸鎂粉的反應(yīng),香豆精和內(nèi)酯類的異羥肟酸鐵反應(yīng),皂甙類的 Liebermann一Burchard反應(yīng),強(qiáng)心甙的K一K反應(yīng),酚類的三氯化鐵反應(yīng),鞣質(zhì)的明膠沉淀反應(yīng),氨基酸的茚三酮反應(yīng),糖類的苯酚一硫酸反應(yīng)等。
(2)色譜法
目前已成為藥材和成藥鑒定中不可缺少的常規(guī)而有效的方法,特別是對(duì)成分復(fù)雜的中藥、天然藥物,有著分離、分析鑒定雙重的優(yōu)勢。常用的色譜鑒定方法有薄層色譜法、氣相色譜法、高效液相色譜法、紙色譜法、凝膠電泳、毛細(xì)管電泳等技術(shù)。
、俦由V法:是中藥鑒定中最常用且簡便、直觀、經(jīng)濟(jì)的一種色譜法,樣品點(diǎn)樣展開后,可通過斑點(diǎn)的熒光或顯色反應(yīng)直接鑒定比較,也可通過掃描定性、定量分析,幾乎適用于所有的動(dòng)、植物類藥材的鑒定。最常用的是硅膠薄層色譜法。
、跉庀嗌V法:適合于揮發(fā)性成分或通過衍生化后能夠氣化的成分的定性、定量分析,具有靈敏度高、分離效率高等優(yōu)點(diǎn),特別是氣相色譜-質(zhì)譜-計(jì)算機(jī)聯(lián)用技術(shù)的發(fā)展,對(duì)于富含揮發(fā)油類藥材的鑒別,氣相色譜已成為一種首選的方法。不揮發(fā)的成分,也可采用裂解氣相色譜或閃蒸氣相色譜來進(jìn)行鑒定。
、鄹咝б合嗌V法:具有柱效高、分離度好、重現(xiàn)性好等特點(diǎn),配以不同類型的檢測器,可對(duì)多種中藥成分進(jìn)行分析,尤其適合于具有紫外吸收的化合物的分析;一般常用于含量測定,但也可根據(jù)特征色譜峰和指紋圖譜進(jìn)行定性分析,特別是三維高效液相色譜(HPLC)的發(fā)展,使定性分析更為方便。
、芗埳V法:是一種分配色譜,可用于氨基酸、糖類等水溶性成分的分析。
⑤凝膠電泳:適合于肽類、核酸、多糖等大分子化合物的分析鑒定。特別是分子生物學(xué)的發(fā)展, DNA指紋圖譜分析應(yīng)用于植、動(dòng)物的鑒定,與次生代謝產(chǎn)物的分析相比,更能反映物種的內(nèi)在遺傳變異規(guī)律。
③毛細(xì)管電泳:是近年發(fā)展起來的新的分析技術(shù),它集HPLC與電泳技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)于一身,使中藥成分的分析范圍更廣闊、更靈敏,因?yàn)樗鼜母旧辖鉀Q了HPLC分析最頭痛的柱效問題。
。3)波譜法
根據(jù)中藥成分結(jié)構(gòu)的不同會(huì)產(chǎn)生特征的吸收峰。常見的有可見一紫外分光光度法、紅外分光光度法、串聯(lián)質(zhì)譜、核磁共振、調(diào)線分析等。
、倏梢娨蛔贤夥止夤舛确ǎ阂话阌糜诳偺崛∥锘虿糠痔崛∥镏心愁惓煞值暮糠治觯部赏ㄟ^導(dǎo)數(shù)光譜法進(jìn)行混合物中單一組分的測定,或通過指紋圖譜進(jìn)行定性分析。
、诩t外分光光度法:主要用于指紋圖譜的分析、鑒定。
、鄞(lián)質(zhì)譜法(MS/MS):可直接用于粉末藥材(成藥)的分析、鑒定,是一種新的質(zhì)譜技術(shù)。
、芎舜殴舱癫ㄗV法(NMR):可用于具有特定結(jié)構(gòu)類型化合物的定性、定量分析,如藥用植物中吡咯里西啶生物堿的NMR分析。
、軽線分析法:主要適用于礦物類藥材的分析、鑒定,也可應(yīng)用于粉末藥物的直接分析。
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